Project 05.106

 

Projectleider	:	Dr. C.D. Richters
Projecttitel	:	Evaluation of the effectiveness of prednisolone-phosphate liposomes as a treatment for burn wounds to reduce contraction and improve scar quality.
Jaar aanvang	:	2005
Duur	:	2 jaar
Bedrag	:	€ 147.981
Organisatie	:	VSBN

Doel
Bepaling van de effectiviteit van behandeling van brandwonden met prednisolon-fosfaat (PLP) gevulde liposomen. Voordat deze studie gestart kan worden moet de optimale dosis PLP bepaald worden en de wijze van toediening.

Achtergrond
Na genezing van brandwonden blijven er vaak lelijke en invaliderend littekens achter. Mogelijk speelt een afwijkende ontstekingsfase een rol, naast het gebrek aan dermaal weefsel in diepere wonden. Bij ratten en varkens waarbij PLP liposomen direct na verwonding locaal werden toegediend was de genezing verbeterd, vooral de wondcontractie was verminderd. Niet liposomaal PLP had geen effect. Door locaal toedienen van liposomen wordt een depot aangelegd wat voor langere tijd werkzaam is. De liposomen worden waarschijnlijk opgenomen door macrofagen waardoor de productie van cytokinen en chemokinen verminderd wordt, resulterend in een betere wondgenezing. In deze proefdierstudies werden de liposomen geresuspendeerd in fysiologisch zout en werd maar één dosis PLP getest.

Methode
Een heetwaterverbrandingsmodel zal gebruikt worden om de keuze tussen toediening van PLP liposomen in 1% Carbopol gel of als spray te maken. Daarnaast zal de optimale concentratie PLP bepaald worden. Vervolgens wordt de gekozen formulering verder getest in een tweede model (varkens); diepe brandwonden die na excisie getransplanteerd worden met een dermaal substituut en een autoloog huidtransplantaat. Deze twee modellen zijn relevant voor de twee groepen patiënten van de klinische studie. Tien patiënten met  halfdiepe brandwonden en tien patiënten met diepe wonden (behandeld met een dermaal substituut in combinatie met autologe huid) zullen worden behandeld met PLP liposomen.

Verwacht resultaat
De verwachting is dat behandeling met PLP liposomen de kwaliteit van de littekens verbetert en de contractie vermindert. De liposomen zouden van groot belang zijn voor het verbeteren van de lange termijnresultaten van de behandeling met dermale substituten. Daarnaast wordt verwacht dat het aantal operaties per patiënt zal dalen (opereren van niet genezende delen en contracturen).

Samenvatting van de resultaten
In een eerder project is gevonden dat liposomen gevuld met prednisolon-fosfaat de contractie van excisie wonden kon verminderen, bij ratten tot 30%. Wanneer prednisolon-fosfaat als vrije stof werd toegediend was er geen effect. Om te onderzoeken of deze liposomen mogelijk ook bij patiënten met brandwonden een verbetering kunnen geven is in het project eerst de formulering zo aangepast dat deze voldoet aan de eisen die vanuit de regelgeving gesteld worden aan geneesmiddelen voor patiënten.

De nieuwe formulering is getest bij ratten in excisie wonden; er werd tot 40% remming van wondcontractie waargenomen. Liposomen met een fluorescent label werden 4 dagen na toediening aangetroffen in macrofagen in het wondbed.

Vervolgens zijn de liposomen getest in brandwonden, heetwater verbrandingen bij varkens. De resultaten waren echter teleurstellend, er was geen duidelijk verschil in genezing tussen de controles en de wonden behandeld met de liposomen. Het uiterlijk van het litteken was ongeveer het zelfde en de wondcontractie was niet significant verminderd.

In een 2^e model; diepe brandwonden die na verwijdering van het dode weefsel werden getransplanteerd met een dermaal substituut en autologe huid (bij varkens) bleken de liposomen de ingroei van bloedvaten en fibroblasten te verminderen. Hierdoor was de overleving van het dermale substituut en de autologe huid veel lager dan bij de controles en verslechterde de genezing. Alleen in 2 van de 12 wonden waarbij wel goede overleving was van de autologe huid werd wel een positief effect van de liposomen waargenomen; het litteken was soepel met weinig contractie.

Er zijn nog extra experimenten in een ander type varken  uitgevoerd; zowel heetwater verbrandingen en excisie wonden maar ook hierbij werden geen significante verschillen gevonden. Vanwege de tegenvallende resultaten is toen besloten het project te beëindigen en de 2^e fase, de klinische studie vooralsnog niet uit te voeren.Bepaling van de effectiviteit van behandeling van brandwonden met prednisolon-fosfaat (PLP) gevulde liposomen. Voordat deze studie gestart kan worden moet de optimale dosis PLP bepaald worden en de wijze van toediening.Na genezing van brandwonden blijven er vaak lelijke en invaliderend littekens achter. Mogelijk speelt een afwijkende ontstekingsfase een rol, naast het gebrek aan dermaal weefsel in diepere wonden. Bij ratten en varkens waarbij PLP liposomen direct na verwonding locaal werden toegediend was de genezing verbeterd, vooral de wondcontractie was verminderd. Niet liposomaal PLP had geen effect. Door locaal toedienen van liposomen wordt een depot aangelegd wat voor langere tijd werkzaam is. De liposomen worden waarschijnlijk opgenomen door macrofagen waardoor de productie van cytokinen en chemokinen verminderd wordt, resulterend in een betere wondgenezing. In deze proefdierstudies werden de liposomen geresuspendeerd in fysiologisch zout en werd maar één dosis PLP getest.Een heetwaterverbrandingsmodel zal gebruikt worden om de keuze tussen toediening van PLP liposomen in 1% Carbopol gel of als spray te maken. Daarnaast zal de optimale concentratie PLP bepaald worden. Vervolgens wordt de gekozen formulering verder getest in een tweede model (varkens); diepe brandwonden die na excisie getransplanteerd worden met een dermaal substituut en een autoloog huidtransplantaat. Deze twee modellen zijn relevant voor de twee groepen patiënten van de klinische studie. Tien patiënten met  halfdiepe brandwonden en tien patiënten met diepe wonden (behandeld met een dermaal substituut in combinatie met autologe huid) zullen worden behandeld met PLP liposomen.De verwachting is dat behandeling met PLP liposomen de kwaliteit van de littekens verbetert en de contractie vermindert. De liposomen zouden van groot belang zijn voor het verbeteren van de lange termijnresultaten van de behandeling met dermale substituten. Daarnaast wordt verwacht dat het aantal operaties per patiënt zal dalen (opereren van niet genezende delen en contracturen).In een eerder project is gevonden dat liposomen gevuld met prednisolon-fosfaat de contractie van excisie wonden kon verminderen, bij ratten tot 30%. Wanneer prednisolon-fosfaat als vrije stof werd toegediend was er geen effect. Om te onderzoeken of deze liposomen mogelijk ook bij patiënten met brandwonden een verbetering kunnen geven is in het project eerst de formulering zo aangepast dat deze voldoet aan de eisen die vanuit de regelgeving gesteld worden aan geneesmiddelen voor patiënten.De nieuwe formulering is getest bij ratten in excisie wonden; er werd tot 40% remming van wondcontractie waargenomen. Liposomen met een fluorescent label werden 4 dagen na toediening aangetroffen in macrofagen in het wondbed.Vervolgens zijn de liposomen getest in brandwonden, heetwater verbrandingen bij varkens. De resultaten waren echter teleurstellend, er was geen duidelijk verschil in genezing tussen de controles en de wonden behandeld met de liposomen. Het uiterlijk van het litteken was ongeveer het zelfde en de wondcontractie was niet significant verminderd.In een 2 model; diepe brandwonden die na verwijdering van het dode weefsel werden getransplanteerd met een dermaal substituut en autologe huid (bij varkens) bleken de liposomen de ingroei van bloedvaten en fibroblasten te verminderen. Hierdoor was de overleving van het dermale substituut en de autologe huid veel lager dan bij de controles en verslechterde de genezing. Alleen in 2 van de 12 wonden waarbij wel goede overleving was van de autologe huid werd wel een positief effect van de liposomen waargenomen; het litteken was soepel met weinig contractie.Er zijn nog extra experimenten in een ander type varken  uitgevoerd; zowel heetwater verbrandingen en excisie wonden maar ook hierbij werden geen significante verschillen gevonden. Vanwege de tegenvallende resultaten is toen besloten het project te beëindigen en de 2 fase, de klinische studie vooralsnog niet uit te voeren.